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核酸抽提

表达系统

服务编号服务项目服务标准价格周期
3101细胞总RNA提取客户提供用来离心收集的细胞数量≥106个,RNA抽提量在10μg左右¥80/样品1周
3102组织总RNA提取提取动植物组织样品中的总RNA,并进行电泳检测。¥80/样品1周
3103质粒抽提提取转染级质粒:量大,一次性可提取≥100μg的质粒,浓度可达1μg/μL; 纯度高,内毒素含量极低,无蛋白质、基因组DNA和RNA污染,可直接用于细胞转染¥3501周

培养细胞总RNA提取

实验步骤

(1)提取培养细胞RNA时,先离心沉淀细胞,每5-10×106个细胞加1ml Trizol后,反复用枪吹打振荡以裂解细胞;

(2)将培养细胞的Trizol裂解液转入EP管中,室温放置5分钟;

(3)在上述EP管中,按照每1ml TRIZOL加0.2ml氯仿的量加入氯仿,用力震荡15秒,室温放置2~3分钟后,12000g 4℃离心15分钟;

(4)取上层水相置于新EP管,按照每1ml TRIZOL加0.5ml异丙醇的量加入异丙醇,室温放置10分钟,12000g4℃离心10分钟;

(5)弃上清,按照每1mlTRIZOL加1ml 75%乙醇进行洗涤,涡旋混合,7500g4℃离心5分钟,弃上清;

(6)RNA沉淀于室温自然干燥;

(7)用Rnase-free water 溶解RNA沉淀,然后电泳检测;

服务内容

从培养细胞中提取总RNA,通过电泳及OD值测定检测RNA纯度

终产品

(1)客户需求的RNA提取样本。

(2)完整实验报告,电泳照片, OD值。

组织总RNA提取

实验步骤

(1)客户提供的动物组织加入1ml TRIZOL,匀浆器充分研磨;

(2)将上述匀浆液转入EP管中,室温放置5分钟;

(3)在上述EP管中,按照每1ml TRIZOL加0.2ml氯仿的量加入氯仿,用力震荡15秒,室温放置2~3分钟后,12000g 4℃离心15分钟;

(4)取上层水相置于新EP管,按照每1ml TRIZOL加0.5ml异丙醇的量加入异丙醇,室温放置10分钟,12000g4℃离心10分钟;

(5)弃上清,按照每1mlTRIZOL加1ml 75%乙醇进行洗涤,涡旋混合,7500g4℃离心5分钟,弃上清;

(6)RNA沉淀于室温自然干燥;

(7)用Rnase-free water 溶解RNA沉淀,然后电泳检测;

服务内容

从培养细胞中提取总RNA,通过电泳及OD值测定检测RNA纯度

终产品

(1)客户需求的RNA提取样本

(2)完整实验报告,电泳照片, OD值

服务说明

(1)细菌、细胞样品需新鲜培养,动物组织、植物组织等样品取样后需液氮或-80℃速冻

(2)用于提取基因组RNA的血液样品在4℃下可保存一周,-20℃下可保存1个月

(3)服务开始前,请与我们及时沟通,以安排科学地取样,实验样品最好使用干冰运输(武汉地区可以上门取样)

组织总RNA提取

实验步骤

(1)客户提供的动物组织加入1ml TRIZOL,匀浆器充分研磨;

(2)将上述匀浆液转入EP管中,室温放置5分钟;

(3)在上述EP管中,按照每1ml TRIZOL加0.2ml氯仿的量加入氯仿,用力震荡15秒,室温放置2~3分钟后,12000g 4℃离心15分钟;

(4)取上层水相置于新EP管,按照每1ml TRIZOL加0.5ml异丙醇的量加入异丙醇,室温放置10分钟,12000g4℃离心10分钟;

(5)弃上清,按照每1mlTRIZOL加1ml 75%乙醇进行洗涤,涡旋混合,7500g4℃离心5分钟,弃上清;

(6)RNA沉淀于室温自然干燥;

(7)用Rnase-free water 溶解RNA沉淀,然后电泳检测;

终产品

(1)客户需求的RNA提取样本;

(2)完整实验报告,电泳照片, OD值;

服务说明

(1)细菌、细胞样品需新鲜培养,动物组织、植物组织等样品取样后需液氮或-80℃速冻;

(2)用于提取基因组RNA的血液样品在4℃下可保存一周,-20℃下可保存1个月;

(3)服务开始前,请与我们及时沟通,以安排科学地取样,实验样品最好使用干冰运输(武汉地区可以上门取样);

质粒大规模制备

产品定义

常规方法提取的质粒由于浓度低且内毒素含量较高,不能直接用于细胞转染实验。利用高品质质粒抽提试剂可为您提供转染级别的大提质粒,可直接用于细胞转染实验。

实验步骤

(1)挑取琼脂培养皿上的单个菌落,移至3-10mlLB培养液中,37℃150rpm培养过夜。

(2)取1.5ml培养液移至Eppendorf管内,12000rpm离心1分钟,弃上清液。

(3)将细菌沉淀悬浮于100μl溶液(GTE溶液)中,强烈振荡使之充分混匀。

(4)加入200μl新鲜配置的溶液(NaOH/SDS溶液),盖严管盖轻轻颠倒离心管数次以混合内容物,置冰上5-10分钟。

(5)加入150μl溶液(5mol/L乙酸钠,pH5.2),轻轻颠倒数次,使溶液充分混匀,冰上放置3-5分钟。

(6)10000rpm,4℃下离心10分钟,将上清液转移至另一离心管中。

(7)加等体积的酚:氯仿,振荡混匀,10000rpm,4℃离心2min,将上清转移至另一离心管中。

(8)加两倍体积无水乙醇沉淀双链DNA,充分混匀,室内放置2分钟

(9)10000rpm,4℃下离心10分钟。

(10)弃上清液,加1ml70%乙醇洗涤沉淀双链DNA,10000rmp,4℃下离心5分钟,倒尽乙醇,吸干管口残留乙醇。

样品要求

客户请提供≥100ng的质粒样品或含有目的质粒的菌种,以满足琼脂糖凝胶电泳检测及转化需要。

服务说明

(1)如果您提供的质粒拷贝数低(1ml培养提取量<1μg),实验费用需要额外增加。<>

(2)我们提供氨苄青霉素、卡那霉素和氯霉素抗生素;使用其它抗生素时,需要您提供抗生素及抗生素的工作浓度。

(3)如果需要进行质粒鉴定(如酶切鉴定、PCR鉴定或测序鉴定等),请提供鉴定的方法,费用额外收取。客户寄来的质粒经鉴定为非目的质粒时,将收取鉴定发生的费用。


终产品

(1)质粒 (1.7≤OD260/OD280≤2.0)、保存菌种;

(2)完整实验报告:电泳照片,OD值测定结果。

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武汉中敏泰克生物科技有限公司是一家专业从事过敏性疾病诊断及预防产品的研发、生产和销售的高科技生物制药企业。

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